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VetLine Leptospira, Elisa kit

Enzimoinmunoensayo para la determinación cualitativa de anticuerpos contra Leptospira en suero veterinario, 96 determinaciones.

Referencia: LEPVT0660

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El enzimoinmunoensayo de VetLine Leptospira ELISA se utiliza para la determinación cualitativa de anticuerpos contra Leptospira en suero de veterinario. Debido al uso de un conjugado multiespecie, la prueba también debería poder utilizarse para otras especies de mamíferos.
La determinación inmunoenzimático cualitativa de anticuerpos específicos se basa en la técnica ELISA (Enzyme-linked Immunosorbent Assay).
Las Placas de Microtitulación están recubiertas con antígenos específicos unen a los anticuerpos de la muestra. Después de lavar los pocillos para eliminar todo el material de muestra no unido, el conjugado de peroxidasa de rábano (HRP) se añade. Este conjugado se une a los anticuerpos capturados. En una segunda etapa de lavado se retira el conjugado no unido. El complejo inmune formado por el conjugado unido se visualizó añadiendo substrato tetrametilbencidina (TMB), que da un producto de reacción azul.
La intensidad de este producto es proporcional a la cantidad de anticuerpos específicos en la muestra. se añade ácido sulfúrico para detener la reacción. Esto produce un cambio de color de azul a amarillo. La extinción a 450/620 nm se mide con un fotómetro de Placa de Microtitulación ELISA.

Reactivos suministrados
  • Placa de Microtitulación: 12 tiras de 8 pocillos rompibles, recubiertos con antígenos de Leptospira, en bolsa de aluminio.
  • Tampón de dilución de muestra: 1 frasco con 100 mL de tampón fosfato (10 mM) para la dilución de muestras; pH 7,2 ± 0,2; color amarillo; listo para usar; tapa blanca; ≤ 0,0015 % (v/v) CMIT/MIT (3:1)
  • Solución de parada: 1 frasco con 15 mL de ácido sulfúrico 0,2 mol/L; listo para usar; tapa roja
  • Tampón de lavado (20× conc.): 1 frasco con 50 mL de tampón fosfato (0,2 M) concentrado 20 veces; pH 7,2 ± 0,2; para el lavado de los pocillos; tapa blanca
  • Conjugado: 1 frasco con 20 mL de proteína A/G marcada con peroxidasa; color amarillo; listo para usar; tapa blanca; ≤ 0,02 % (v/v) MIT
  • Solución de sustrato TMB: 1 frasco con 15 mL de 3,3’,5,5’-tetrametilbenzidina (TMB), < 0,1 %; listo para usar; tapa amarilla
  • Control positivo: 1 vial con 2 mL; color amarillo; listo para usar; tapa roja; ≤ 0,02 % (v/v) MIT
  • Control de punto de corte (cut-off): 1 vial con 3 mL; color amarillo; listo para usar; tapa verde; ≤ 0,02 % (v/v) MIT
  • Control negativo: 1 vial con 2 mL; color amarillo; listo para usar; tapa azul; ≤ 0,0015 % (v/v) CMIT/MIT (3:1)