VetLine Leptospira, Elisa kit
Enzymimmunoassay zur qualitativen immunenzymatischen Bestimmung von Antikörpern gegen
Leptospira in veterinärem Serum, 96 Bestimmungen.
Leptospira in veterinärem Serum, 96 Bestimmungen.
Artikelnummer:
LEPVT0660
Inhalt:
Kit
(96 Vertiefungen)
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Der VetLine Leptospira ELISA ist für den qualitativen Nachweis spezifischer Antikörper gegen Leptospira in veterinärem Serum bestimmt. Aufgrund der Verwendung eines Multispezies-Konjugats sollte der Test auch für andere Säugetierarten verwendet werden können.
Die qualitative immunenzymatische Bestimmung von spezifischen Antikörpern beruht auf der ELISA (Enzyme-linked Immunosorbent Assay) Technik.
Die Mikrotiterplatten sind mit spezifischen Antigenen beschichtet, an welche die korrespondierenden Antikörper aus der Probe binden. Ungebundenes Probenmaterial wird durch Waschen entfernt. Anschließend erfolgt die Zugabe eines Meerettich-Peroxidase (HRP) Konjugates. Dieses Konjugat bindet an die an der Mikrotiterplatte gebundenen spezifischen Antikörper. In einem zweiten Waschschritt wird ungebundenes Konjugat entfernt. Die Immunkomplexe, die durch die Bindung des Konjugates entstanden sind, werden durch die Zugabe von Tetramethylbenzidin (TMB)-Substratlösung und eine resultierende Blaufärbung nachgewiesen.
Die Intensität des Reaktionsproduktes ist proportional zur Menge der spezifischen Antikörper in der Probe. Die Reaktion wird mit Schwefelsäure gestoppt, wodurch ein Farbumschlag von blau nach gelb erfolgt. Die Absorption wird bei 450/620 nm mit einem Mikrotiterplatten-Photometer gemessen.
Gelieferte Reagenzien
- Mikrotiterplatte: 12 teilbare 8er-Streifen, beschichtet mit Leptospira Antigenen; in wieder verschließbarem Aluminiumbeutel.
- Probenverdünnungspuffer: 1 Flasche mit 100 mL Phosphatpuffer (10 mM) zur Probenverdünnung; pH 7,2 ± 0,2; gelb gefärbt; gebrauchsfertig; weißer Verschluss; ≤ 0,0015 % (v/v) CMIT/MIT (3:1).
- Stopplösung: 1 Flasche mit 15 mL Schwefelsäure, 0,2 mol/L; gebrauchsfertig; roter Verschluss.
- Waschpuffer (20× konz.): 1 Flasche mit 50 mL eines 20-fach konzentrierten Phosphatpuffers (0,2 M); pH 7,2 ± 0,2; zum Waschen der Wells; weißer Verschluss
- Konjugat: 1 Flasche mit 20 mL Peroxidase-markiertem Protein A/G; gelb gefärbt; gebrauchsfertig; weißer Verschluss; ≤ 0,02 % (v/v) MIT.
- TMB-Substratlösung: 1 Flasche mit 15 mL 3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidin (TMB), < 0,1 %; gebrauchsfertig; gelber Verschluss
- Positivkontrolle: 1 Vial mit 2 mL; gelb gefärbt; gebrauchsfertig; roter Verschluss; ≤ 0,02 % (v/v) MIT
- Cut-off-Kontrolle: 1 Vial mit 3 mL; gelb gefärbt; gebrauchsfertig; grüner Verschluss; ≤ 0,02 % (v/v) MIT
- Negativkontrolle: 1 Vial mit 2 mL; gelb gefärbt; gebrauchsfertig; blauer Verschluss; ≤ 0,0015 % (v/v) CMIT/MIT (3:1)
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